高效液相色譜法同時測定複雜食品基質中8種合成色素的含量

2021-08-23 15:31:02來源：世界杯賽程預測導刊

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陳利輝
（中紡檢測（福建）有限公司，福建泉州 362000）

摘要：本文對高效液相色譜法同時測定複雜食品基質中8種合成色素含量進行研究。結果表明，以乙醇-乙腈-甲醇-氨水混合溶液為提取溶劑，質量濃度為0.02 mol/L的乙酸銨溶液為流動相色譜條件下，上述8種合成色素有最佳的分離效果，且各色素的加標回收率在84.5%～99.1%，在1.4%～2.5%。該檢測方法能夠測定複雜食品基質的合成色素，有效彌補傳統檢測方法的缺陷，提高檢測效果，可被大麵積推廣應用。
關鍵詞：高效液相色譜法；複雜食品基質；合成色素檢測
傳統檢測方法存在種種缺陷，難以滿足實際檢測準確性需要，因此有必要加強對高效液相色譜法合成色素檢測分析，更好地保障世界杯賽程預測。
1 材料與方法
1.1 試驗儀器
高效液相色譜儀，型號為島津LC-2030C；真空脫氣機，型號為島津LC-2030C係列，與高效液相色譜儀配套；自動進樣器；二極管陣列檢測器（PDA）；ProElut PWA-2固相萃取柱，規格為150 mg/6 mL。
1.2 試驗試劑
乙酸銨溶液，濃度為0.02 mol/L；提取溶劑；質量濃度為0.500 g/L的日落黃、檸檬黃、胭脂紅、莧菜紅、亮藍標準溶液，質量濃度為1.00 g/L的赤蘚紅、誘惑紅標準溶液，質量濃度為93.5%的酸性紅標準品。
1.3 試驗方法
稱取1 g樣品，並將其置於50 mL離心管中，然後再加入20 mL的提取溶劑，漩渦振蕩處理2 min。接著，超聲提取10 min。再於6 000 r/min條件下進行離心處理，提取上層清液。在此基礎上，再取下層殘留物，加入10 mL提取溶劑，再進行漩渦振蕩處理2 min，超聲提取15 min，於6 000 r/min的條件下，離心處理溶液2 min，再次收集上層提取物[1-2]。針對下層提取物，再按照上述步驟，重複提取3次，將上述提取3次的上層清液合並在一起，置於40 ℃水浴條件下，然後進行減壓蒸發濃縮，在濃縮至3 mL後，加入2 mL水，混勻，用甲酸將溶液pH調至5左右。采用ProElut PWA-2固相萃取柱，實施淨化處理。依次加入5 mL甲酸溶液（體積分數為2%）、水與甲醇（體積分數為2%），實施小柱衝洗，同樣棄掉流出液，用洗耳球吹幹小柱[3]。加入5 mL氨水-甲醇（15+85）溶液，對小柱實施洗脫處理，並完成洗脫液的收集。然後將其置於50 ℃的環境下，實施氮吹操作，在吹至0.5 mL後，采用濃度為0.02 mol/L乙酸銨溶液進行定容，在定容至1 mL後，0.45 µm膜過濾，檢測。
2 結果與分析
2.1 色素提取方法選擇
由於蛋白質不溶於乙醇，因此可采用乙醇將不溶於水的蛋白質除去，成功分離色素，為提高分離效果，再加入少量氨水，使色素在乙醇中充分溶解，進一步降低色素的提取難度[4]。因此，本次試驗選用乙醇-乙腈-甲醇-氨水混合溶液作為提取溶劑。
2.2 色譜條件選擇
在本次試驗中，采用了3種不同流動相對樣品實施分析，即乙腈-水、乙腈-乙酸銨和甲醇-乙酸銨。由試驗結果知，乙腈-水為流動相，難以有效分離合成色素；而采用甲醇-乙酸銨，隻能夠分離部分合成色素；當采用乙腈-乙酸銨流動相時，上述8種合成色素均能夠得到有效的分離，且獲得的峰形也比較優秀[5]。為進一步驗證這一結果，確定流動相濃度，試驗采用了0.01～0.05 mol/L的5種不同濃度乙酸銨溶液進行對比。結果發現，當采用質量濃度為0.02 mol/L的乙酸銨溶液時，上述8種合成色素有最佳的分離效果，後續若繼續增加該濃度數值，相應峰形和分離效果改善均不明顯，甚至還出現下降的趨勢。基於此，本次試驗選用質量濃度為0.02 mol/L的乙酸銨溶液作為流動相色譜條件。
2.3 精密度和回收試驗
在試驗開展的過程中，采用空白豬大腸樣品，並在此基礎上，加入了8種合成色素標準溶液，不同標準溶液的檢出限濃度分別為標準檢出限度的1倍、2倍及10倍，並在試驗方法的指導下，完成樣品的處理，並平行測定6次，計算回收率及相對標準偏差（RSD）。由表1可知，各色素的加標回收率在84.5%～99.1%，RSD在1.4%～2.5%，與最終檢測要求相符合。除此之外，試驗改變了檢測樣品後，比如采用了茶葉等，最終回收率與精密度結果依然符合檢測
要求。

3 結語
綜上所述，加強對食品中常見的食品合成色素的檢測，要采用高效液相色譜法測定複雜食品基質的合成色素。試驗結果表明，該檢測方法能夠有效彌補傳統檢測方法的缺陷，提高了檢測效果，能夠大麵積推廣應用。
參考文獻
[1]姚幫本,喬冬晴,童寧,等.超高效液相色譜串聯質譜法同時檢測13種植物生長激素殘留物[J].世界杯賽程預測質量檢測學報,2020(11):3500-3507.
[2]趙允，李雪芳.複雜食品樣品中5種合成色素的超高效液相色譜快速檢測方法[J].食品科技,2016(2):306-308.
[3]孫曉娟.高效液相色譜法對食品中合成色素含量測定方法的研究[D].青島:青島科技大學,2019.
[4]何林飛,劉常凱,唐文武,等.固相萃取-高效液相色譜法測定自製飲料中10種合成色素的含量[J].食品科技,2019,44(2):339-343.
[5]陳東洋,張昊,馮家力,等.固相萃取-高效液相色譜法同時測定食品中4種合成色素[J].分析試驗室,2020,39(2):203-206.