□ 邱慧珍 福建省南平市食品藥品檢驗檢測中心

摘　要：本研究的目的是建立測定西紅柿、蘋果、茶葉中吡蟲啉殘留量的QuECHERS-高效液相色譜法(HPLC)，通過加標測定出其回收率、精密度、檢出限均在理想範圍之內。具體測定方法為，樣品經1%醋酸乙腈20mL、硫酸鎂6g、醋酸鈉1.5g，渦旋提取，離心，提取液經400mg PSA、400mg C18、1200mg MgSO4淨化，吸取上清液上機測定。結果顯示，吡蟲啉在0.2~5.0mg/L範圍內線性關係良好，R=0.9999，西紅柿、蘋果、茶葉基質回收率均在93%~100%範圍內，西紅柿、蘋果檢出限0.02mg/kg、定量限0.1mg/kg;茶葉檢出限0.05mg/kg，定量限0.2mg/kg。

關鍵詞：吡蟲啉 西紅柿 蘋果 茶葉 高效液相色譜法 QuECHERS

1 引言

吡蟲啉屬於煙堿類超高效殺蟲劑，不僅有廣譜、高效、低毒、低殘留，害蟲不易產生抗性等優點，還具有觸殺、胃毒和內吸等多重作用。害蟲接觸藥劑後，會因中樞神經正常傳導受阻而麻痹死亡。目前，吡蟲啉的檢測方法主要有毛細管電泳[1]、熒光光譜[2]、膠體金免疫層析[3]、液相色譜、液質聯用等。GB/T 23379-2009《水果、蔬菜及茶葉中吡蟲啉殘留的測定 高效液相色譜法》中，吡蟲啉的測定主要通過乙腈提取、鹽析、濃縮液經固相萃取淨化、乙腈洗脫、高效液相色譜等程序進行檢測，但該標準方法回收率低、耗時長，不適用於大批量農殘檢測。本文通過QuECHERS方法選取3個代表性樣品(西紅柿、蘋果、茶葉)測定吡蟲啉殘留量，希望建立一種簡單、快捷、靈敏、價廉的液相色譜法。

2 材料與方法

2.1 試劑與儀器

吡蟲啉標準品(Dr.Ehrenstorfer GmbH，批號：G149997 CAS:138261-41-3);乙腈(德國默克，批號：JB079830);QuECHERS提取包(島津，貨號5010-050020);QuECHERS淨化包(島津，貨號5010-015033);液相色譜儀-二極管陣列檢測器(Waters，E2695/2998);電子天平(奧豪斯儀器，AR2140);離心機(湖南湘儀有限公司，H1850);醫用超純水機(杭州萬潔水處理設備有限公司，WJ-RO-70)。

2.2 方法

2.2.1 色譜條件

色譜柱C18(ACE 250×4.6mm，5μm);進樣量：10μL;流速：1.0mL/min;檢測波長：270nm;流動相A：0.1%磷酸水，流動相B：乙腈;梯度：0~5min、85%A~80%A，5~15min、80%A~75%A，15~22min、75%A~0%A，22~28min、0%A~85%A。

2.2.2 標準貯備液

準確稱取10mg吡蟲啉標準品置於10mL容量瓶中，加入乙腈超聲溶解，定容，得到1000μg/mL的標準貯備液，於-18℃的冰箱保存。

2.2.3 樣品處理

水果、蔬菜類樣品各稱取10g，茶葉類樣品稱取2g，分別置於50mL離心管中;準確加入1%醋酸乙腈20mL，劇烈震蕩1min;將離心管置於冰水浴中，加入提取試劑包(6g硫酸鎂、1.5g醋酸鈉)，劇烈震蕩1min，離心;準確移取5mL上清液到淨化管中，劇烈震蕩30s，離心，取上清液，待上機測定。

3 結果

3.1 色譜條件選擇

在200~400nm波長範圍內對吡蟲啉標準品進行掃描，發現在269.8nm處有最大吸收，故選擇270nm為檢測波長。對GB/T 23379-2009中流動相梯度進行優化，於15min時提高有機相比例。該色譜條件下，吡蟲啉於13min出現峰值，24~28min處有背景雜峰，因此洗脫時間由46min縮短至30min，以節約分析時間。

3.2 標準曲線和精密度

標準貯備液“2.2.2”分別逐級稀釋成濃度為0.2、0.5、1.0、2.0、5.0μg/mL的係列濃度標準溶液，按照“2.2.1”色譜條件上機測定，以吡蟲啉標準溶液濃度為橫坐標(X)，峰麵積為縱坐標(Y)，得線性方程Y=9.4×104X;R=0.9999。在0.2~5.0mg/L範圍內，吡蟲啉的進樣質量濃度與其對應的峰麵積線性關係良好。2μg/mL濃度標液連續進樣6針，RSD為0.4%，精密度良好。

3.3 樣品測定和加標回收

在空白的蘋果樣本中添加不同濃度的吡蟲啉標準溶液，添加濃度分別為0.4、1.0、2.0mg/kg，每個濃度做6個平行樣品。結果顯示，回收率分別為95%~100%、94%~96%、93%~95%，相對應的RSD分別為2.7%、1.2%、0.9%。

在空白的西紅柿樣本中添加不同濃度的吡蟲啉標準溶液，添加濃度分別為0.4、1.0、2.0mg/kg，每個濃度做6個平行樣品。結果顯示，回收率分別為95%~100%、94%~96%、94%~96%，相對應的RSD分別為2.7%、0.9%、0.8%。

在空白的茶葉樣本中添加不同濃度的吡蟲啉標準溶液，添加濃度分別為2.0、5.0、10mg/kg，每個濃度做6個平行樣品。結果顯示，回收率分別為100%、96%~98%、93%~96%，相對應的RSD分別為0%、1.1%、1.3%。

3.4定量限和檢出限

空白蘋果基質加標，當加標水平為0.1mg/kg時，信噪比S/N值大於10，定量限為0.1mg/kg;當加標水平為0.02mg/kg時，信噪比S/N值大於3，檢出限為0.02mg/kg。空白茶葉基質加標，當加標水平為0.2mg/kg時，信噪比S/N值大於10，定量限為0.2mg/kg;當加標水平為0.05mg/kg時，信噪比S/N值大為3，檢出限為0.05mg/kg。

4 結論

本研究選取蔬菜、水果、茶葉為典型樣本，按照QuECHERS前處理方法，結合高效液相色譜法測定吡蟲啉的含量。結果表明，上述實驗方法的檢出限、加標回收率、精密度和重複性均符合要求，且基質效應不明顯。另外，QuECHERS還具有簡便、快捷、節省溶劑，以及對實驗室前處理設備條件要求低等優點，因此更適合大多數實驗室進行批量檢測篩查。

參考文獻：

[1] 孫娟，陳冠華，王坤，等.毛細管電泳在線電推掃測定蔬菜中3中氯化煙堿類農藥殘留[J].分析化學，2020，38(8)：1151-1155.

[2]季仁東，趙誌敏，張琳，等.蘋果汁中吡蟲啉農藥殘留熒光檢測研究[J].光譜學與光譜分析，2013，33(3)：668-671.

[3]樓小華，高川川，朱文靜，等.膠體金免疫層析法快速檢測煙草中吡蟲啉殘留[J].世界杯賽程預測質量檢測學報，2017，8(5):1739-1744.