諾如病毒感染性腹瀉是在全世界範圍內的流行疾病，全年均可發生感染，感染對象主要是成人和學齡兒童，寒冷季節呈現高發狀態。諾如病毒感染性強，近些年國內外也爆發過多次由諾如病毒引起的病毒感染事件。為了讓大家更好地了解諾如病毒，北京良潤生物科技有限公司總經理劉磊老師來到了食安大講堂，向觀眾分享了他多年來從事諾如病毒研究的相關認知。
諾如病毒感染事件
近年來，國內爆發了多次諾如病毒感染事件：2010年12月，廣州從化有429人發病，調查後最終確認是由水汙染引起的諾如病毒感染；2013年4月，揭陽市某學院有近400人患感染性腹瀉，經當地疾控中心化驗判斷，主要是諾如病毒傳播引起的；2014年2月，嘉興市有400多名學生感染就醫，累計報告發病人數511人；2014年12月，廣州越秀區某小學21人發病，波及217人；2015年1月深圳有140名發病，經檢測已確定引發此症狀的原因係諾如病毒；2016年3月，北京市衛計委公布數據顯示，2016年1~2月，北京市報告了31起急性胃腸炎聚集性疫情，其中有28起是由諾如病毒引發。以上每次事件波及的人數眾多，對我國人民的生命財產安全造成了很大損失。
諾如病毒檢測方法
諾如病毒（Norovirus，NoV），又稱諾瓦克病毒，是一組形態類似、抗原略有不同的病毒顆粒。可感染人或動物，引發急性腸胃炎、冬季嘔吐性疾病、胃腸性流感等病症，主要臨床表現為頭痛、發熱、惡心、腹痛腹瀉等，是非細菌性胃腸炎的主要病原體之一。隨著檢測技術的不斷進步，對於諾如病毒的檢測也出現了越來越多的方法，其中代表性的方法有電鏡法、免疫法、RT-PCR 3種（對比見表1）。 諾如病毒最初是通過電鏡檢測發現的，因此最初的諾如病毒診斷方法主要是電鏡法（EM）與免疫電鏡法（IEM）。通過電鏡觀察病毒粒子的形態來確認諾如病毒，需要的病毒濃度較高，因此靈敏度與特異性相對較低，並且隻能夠在比較專業的檢測機構才能進行，無法普及。
隨著人們對諾如病毒研究的不斷深入，免疫法逐漸被用來檢測諾如病毒。免疫法主要有放射免疫法（RIA）、生物素-親和素免疫法（Biotin-Avidin Immunoassy）以及酶聯免疫法（ELISA）。RIA的靈敏度要比IEM高10~100倍，但需要使用放射元素進行標記，且時間較長（6d）；Biotin-Avidin Immunoassy是美國疾病預防控製中心基於RIA建立的簡化方法，靈敏度與RIA相近；ELISA具有靈敏度高、耗時少、經濟的優點，便於廣泛推廣，但株型特異性太強，應用範圍較狹窄。
隨著分子生物學的飛速發展，市場上出現了更加靈敏、特異、快速的核酸檢測方法，包括等溫核酸擴增（NASBA）、逆轉錄聚合酶鏈式反應（RT-PCR）、熒光染料RT-PCR、熒光探針RT-PCR、多重RT-PCR等。RT-PCR方法是目前檢測諾如病毒應用最廣泛的方法，被稱為檢測諾如病毒的“金標準”。NASBA直接擴增RNA來進行檢測，儀器相對簡便，通過瓊脂糖凝膠電泳、印跡雜交或者熒光檢測來鑒定結果，靈敏度低於RT-PCR；RT-PCR通過逆轉錄RNA模板、PCR擴增特異性產物，使用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定結果；熒光染料RT-PCR通過向RT-PCR反應體係中添加非特異性的熒光染料，可以在反應過程中監測擴增產物的生成量，但需要做熔解曲線分析來確定反應的特異性；熒光探針RT-PCR通過特異性的熒光探針與引物，可實時監控反應過程中特異性產物的變化，並且可以實現同一管中多個基因的檢測（多重），特異性較好，假陽性率低，檢測靈敏度可達10~100拷貝/反應，可用於取代普通RT-PCR。