《世界杯賽程預測 導刊》刊號:CN11-5478/R 國際:ISSN1674-0270

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食品中諾如病毒的檢測

2017-06-07 15:25:12來源:世界杯賽程預測 導刊

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□ 高光普 本刊記者
國家對諾如病毒的檢測製定了詳細的標準,名為GB 4789.42-2016《 世界杯賽程預測國家標準 食品微生物學檢驗 諾如病毒檢驗》。GB 4789.42-2016標準規定了食品中諾如病毒的實時熒光RT-PCR檢測方法。
近年來,國內外多個地區都爆發過諾如病毒感染事件。據統計,1998~2015年,美國諾如病毒爆發事件共計19000多起,受感染的人數高達37萬;我國自2017年春季以來也爆發了多起諾如病毒感染事件。那麼諾如病毒到底是什麼?針對食品中的諾如病毒,我國是否有與之相對應的標準法規?如何對諾如病毒進行檢驗檢測?帶著這些問題,本刊記者采訪了北京良潤生物科技有限公司(以下簡稱“良潤生物”)總經理劉磊先生,請他就諾如病毒的相關問題進行了解答。

記者:近年來,諾如病毒感染事件頻發對人民的生命財產安全造成了巨大損失,那麼諾如病毒到底是什麼?目前在全世界範圍內的感染情況是怎樣的?
劉磊:諾如病毒(Norovirus,NoV)又稱諾瓦克病毒,是一組形態類似、抗原略有不同的病毒顆粒。可感染人和動物並引起急性腸胃炎、冬季嘔吐性疾病、胃腸性流感等病症,主要臨床表現為頭痛、發熱、惡心、腹痛腹瀉等,是非細菌性胃腸炎的主要病原體之一。諾如病毒是一種單鏈RNA病毒,主要分為6個基因型(GI-GVI),其中常見的世界性流行諾如病毒基因型主要分為GI和GII。
由諾如病毒引起的感染性腹瀉在全世界範圍內均有流行,全年均可引發感染,感染對象主要是抵抗力弱的成人和學齡兒童,且寒冷季節呈高發趨勢。在美國每年所有的非細菌性腹瀉暴發中,60%~90%由諾如病毒引起,荷蘭、英國、日本、澳大利亞等國家也都有類似情況發生。在中國5歲以下的腹瀉兒童中,諾如病毒檢出率為15%左右,通過血清抗體水平調查表明中國人群中諾如病毒的感染亦十分普遍。

記者:對於諾如病毒的檢測,我國是否有著相應的標準法規?
劉磊:我國政府十分重視 世界杯賽程預測問題,對於諾如病毒的檢測也製定了非常詳細的標準,名為GB 4789.42-2016《世界杯賽程預測 國家標準 食品微生物學檢驗 諾如病毒檢驗》。GB 4789.42-2016標準規定了食品中諾如病毒的實時熒光RT-PCR檢測方法,此標準適用於貝類、生食蔬菜、胡蘿卜、瓜、堅果等硬質表麵食品,草莓、西紅柿、葡萄等軟質水果等食品中諾如病毒核酸的檢測。
GB 4789.42-2016中對檢測諾如病毒所需要的材料有著詳細限定,分別包括實時熒光PCR儀、低溫冰箱、微量移液器、網狀過濾袋、無菌棉拭子、無菌剪刀、無菌鉗子、pH計或pH試紙、無菌刀片或等效均質器、離心機。而關於試劑,GB 4789.42-2016中還注明,除有特殊說明外,所有實驗用試劑均為分析純,實驗用水均為無RNase超純水。
對於檢測程序的要求,GB 4789.42-2016以圖表的形式清晰的展現了出來(見圖1)。
GB 4789.42-2016中對軟質水果或生食蔬菜、硬質食品表麵、貝類3種不同的的樣品分別製定了不同的操作步驟。
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圖1 GB 4789.42-2016諾如病毒檢測程序
記者:針對食品中諾如病毒的檢測,良潤生物有著怎樣的解決方案?
劉磊:針對諾如病毒的檢測,良潤生物從RNA提取、過程控製到檢測及定量都有配套的產品,可以實現樣品中諾如病毒的快速檢測,並符合標準要求。
良潤生物的諾如病毒解決方案包括:病毒RNA提取試劑盒、MS2過程控製試劑盒(RT-PCR探針法)、諾如病毒核酸(GⅠ/GⅡ)檢測試劑盒(RT-PCR探針法)、諾如病毒標準係列(GI/GII)定量試劑盒等。
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記者:諾如病毒檢測的過程控製需要對照病毒,良潤生物推出的MS2過程控製試劑盒具有哪些優勢呢?
劉磊:諾如病毒檢測對過程控製所需對照病毒要求易於體外培養,與諾如病毒具有相似的理化特性,並且與諾如病毒基因組組成不同,不會發生交叉反應,另外還要求是單股正鏈RNA病毒,而且在自然狀態下不會汙染食品。目前常用的有門果病毒、MS2噬菌體。過程控製選用MS2噬菌體的優勢:
① 國際通用—歐盟、美國等地區和國家;
② 結構和病毒相似,性質類似,更準確的標定;
③ 與其他病毒RNA無交叉;
④ 食品中不含有該噬菌體,無背景;
⑤ 可以實現細胞外擴增,實現精準定量;
⑥ 可同時標定回收率和擴增效率。
良潤生物簡介
北京良潤生物科技有限公司作為國家高新技術企業,專注於食品中微生物、致病菌、病毒、細菌毒素等快速檢測的研究,相繼建立了即用培養技術平台、免疫技術平台、分子技術平台及快速前處理技術平台,產品涵蓋微生物測試片、致病菌膠體金快速檢測卡、致病菌快速增菌培養基、致病菌快速檢測組合、免疫磁珠快速測試盒、熒光定量PCR試劑盒等。在此基礎上,為用戶提供更合適的世界杯賽程預測 檢測解決方案。
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