實驗部分，LC-20ADXR高效液相色譜儀;Thermo Aquasil C18;API4000四極杆串聯質譜儀;Milli-Q高純水發生器;德國IKA HS260型數顯往複式搖床。硝基呋喃類有關藥物方麵的代謝物標準以及內標物質：DNSH;氨基脲、1-氨基-2-內酰脲;5-甲基嗎啉-3-氨基-2-唑烷基酮、3-氨基-2-唑烷基酮、13C、硝呋奇特和氘、15N標記的AOZ-D4、13C3-AHD、AMOZ-D5、SEM-13C15N2。其純度全部大於99%。有關水楊酰肼都是由硝呋奇特進行水解獲得。相關的樣品有：蝦、魚以及蟹等都是在本地市場購買，在樣品使用之前全部去殼、去骨。

　　首先稱取1.0g均質試樣在50mL塑料離心管當中，逐一加入10mL水、0.5mL鹽酸溶液以及500μL 2-硝基苯甲醛溶液，在其混勻之後放在37℃恒溫振蕩器當中保持16h。把經過水解以及衍生之後的樣品溶液拿出來後，加入0.1mol/L磷酸氫二鈉溶液5mL，使用1.0mol/L氫氧化鈉溶液來調節pH7.0～7.5。在這種中性溶液當中加入2.0g中性氧化鋁，進行1min搖勻，在10℃之下使用4000r/min離心3min。將上層清液轉移到裝有16ml乙酸乙酯的相關塑料離心管當中，進行震蕩提取。然後再於10℃之下憑借4000r/min離心3min，從而使其分層。把上清液轉移到20ml氮吹管當中，再向其加入10ml乙酸乙酯進行重複震蕩提取。通過上述操作步驟之後，合並有關的提取液，將提取液置於40℃下利用氮氣吹幹。吹幹過後，在氮吹管當中加入1mL乙腈-0.1%甲酸溶液。再向其加入2mL乙腈飽和的有關正己烷去脂。將下層溶液轉移到2mL離心管當中，憑借16000r/min離心5min，取上清液經過0.2μm濾膜之後轉移到進樣小瓶當中待測。Thermo Aquasil C18色譜柱。流動相A是含0.1%甲酸的乙腈，B是含0.1%甲酸的5mmol/L乙酸銨溶液。有關梯度洗脫的具體程序為：0～4min，10%A～99%A;4～8min，99%A;8～8.5min，99%A～10%A。流速：0.6mL/min。進樣量：20μL。柱溫：常溫。應用電噴霧有關離子泵;霧化氣壓力：70psi;噴霧電壓：5500V;氣簾氣壓力：35psi：離子源溫度：550℃;輔助氣壓力：60psi。定性離子對以及定量離子對方麵的其他參數詳見表1。

　　關於內標的使用降低了繁瑣的有關前處理過程對於最終定量具體結果準確度產生的影響。分別應用AMOZ、SEM、AHD以及AOZ這四種分析物各自相關的同位素標記物當做內標定量，降低了外標法對於回收率方麵的影響，從而使定量能夠更加準確。在對於DNSH實施測定時發現，其信號強度變化較大，並且分析所具有的準確度較低，和另外四種硝基呋喃類有關代謝物比較，DNSH實際的離子信號強度還要更低，與此同時還缺少同位素方麵的內標。 在有關優化實驗的條件之下，利用羅非魚相關的空白基質溶液來配置0.5、1、2、5、10μg/L的係列混合標準有關溶液實施測定，憑借內標法定量，利用分析物和內標物峰麵積之間的比值對於分析物濃度實施線性回歸，其具體結果見表2 。五種硝基呋喃類有關藥物方麵的代謝物在0.5～10μg/L範圍之內線性良好，有關係數都大於等於0.9976,。憑借三倍信噪比來確定五種硝基呋喃類有關藥物方麵的代謝物檢出限是0.2μg/kg，利用十倍信噪比來確定其實際的定量限是0.5μg/kg。

　　在羅非魚的相關空白基質當中分別添加五種硝基呋喃類有關藥物的代謝物方麵的混合標準溶液以及內標相關的混合標準溶液，根據前述方式添加相關的回收實驗以及精密度實驗，並且計算實際的平均回收率以及相對標準偏差，其具體結果詳見表3。對於0.5、1.0、2.0以及4.0μg/kg的有關添加水平之下，五種化合物實際的平均回收率是在81.3%～100.5%之間，RSD是3.4%～10.0%。一旦目標分析物具體檢出值超出有關方法線性範圍，需要稀釋一定倍數，從而使其在線性範圍之內。

　　硝呋索爾是新發現的一種呋喃類藥物，當前階段我國還沒有建立對這種藥物的相關研究方法。本文所應用的方法是利用液相色譜-三重四極杆串聯質譜法對於水產品當中的含蓋硝呋索爾在內的五種硝基呋喃類有關藥物方麵的代謝物共同進行定性以及定量分析，對於保證我國世界杯賽程預測的方麵具有非常重要的意義。

　　蔣翠紅 長春市水產品質量安全檢測中心