□ 邱雄雄 詹鬆 島津企業管理(中國)有限公司

　　呋喃苯烯酸鈉屬於硝基呋喃類藥物,是人工合成的一種廣譜抗菌藥物,對動物和魚類的細菌預防和治療有良好效果。但是,世界衛生組織和聯合國糧農組織聯合報道硝基呋喃類藥物具有潛在的致突變和致癌性。為保護消費者的健康，世界各國紛紛禁止硝基呋喃類藥物在食品動物上的使用。然而，這些藥物的違法使用現象仍然存在。

　　目前，國內外色譜法對呋喃苯烯酸鈉殘留檢測主要采用HPLC-UV作為檢測手段，而HPLC法由於檢測靈敏度低、前處理操作繁瑣費時,不能滿足進出口貿易中各國對呋喃苯烯酸鈉殘留限量要求。為保證我國有關食品的進出口貿易，促進呋喃苯烯酸鈉殘留監控工作的順利開展,建立一種快速簡便、靈敏度高、準確度好的檢測方法勢在必行。

　　本文使用島津LCMS-8040三重四極杆質譜，參考《SN/T 2451-2010 動物源性食品中呋喃苯烯酸鈉殘留量檢測方法 液相色譜-質譜/質譜法》，建立了UHPLC-MS/MS法檢測乳製品中呋喃苯烯酸鈉殘留。采用乙腈提取，正己烷萃取淨化,方法簡便、快速，可用於乳製品進出口樣品的監控和檢測。

　　實驗

　　儀器

　　實驗使用島津超高效液相色譜儀LC-30A與三重四極杆質譜儀LCMS-8040聯用係統。具體配置為：LC-30AD×2輸液泵，DGU-20A5在線脫氣機，SIL-30AC自動進樣器，CTO-30A柱溫箱，CBM-20A係統控製器，LCMS-8040三重四極杆質譜儀，LabSolutions Ver.5.53色譜工作站。

　　分析條件

　　液相色譜條件

　　分析儀器：LC-30A係統;

　　色譜柱：Shimadzu Shim-pack XR-ODSIII 2.0mmI.D.×50mmL,1.6μm;

　　流速：0.2mL/min;

　　進樣體積：5μL;

　　柱溫：40℃;

　　流動相：A-0.1%甲酸水;B-乙腈;

　　洗脫方式：梯度洗脫，B相初始濃度45%，梯度洗脫見表1。

　　質譜條件

　　分析儀器：LCMS-8040;

　　離子源：ESI，負離子掃描;

　　離子源接口電壓：4.5kV;

　　霧化氣：氮氣3.0L/min;

　　幹燥氣：氮氣20L/min;

　　碰撞氣：氬氣;

　　脫溶劑管溫度：250℃;

　　加熱模塊溫度：450℃;

　　掃描模式：多反應監測(MRM);

　　駐留時間：150ms;

　　延遲時間：3ms;

　　MRM參數見表2。

　　樣品製備

　　樣品前處理方法

　　參考《SN/T 2451-2010 動物源性食品中呋喃苯烯酸鈉殘留量檢測方法 液相色譜-質譜/質譜法》前處理方法。

　　稱取約5g牛奶試樣，置於50mL聚丙烯具塞離心管中，加入5g無水硫酸鈉混勻後，加入25mL乙腈，渦旋混勻30s，超聲提取5min，於4000r/min離心5min。上清液轉移至50mL容量瓶中。殘渣依上述方法再提取一次，合並上清液，混勻後用乙腈定容至50mL。移取10mL提取液，於40℃氮氣吹至近幹，加入1.0mL0.1%甲酸溶液+乙腈(4∶1)溶液渦旋30s溶解殘渣。向溶解液中加入3mL乙腈飽和正己烷，震蕩後靜置分層，取下層溶液於9500rpm離心5min，過濾上機測試。

　　標準溶液配製

　　用甲醇配製10mg/L的混合標準中間溶液，用乳製品空白基質溶液稀釋成濃度為1、10、25、50、100µg/L標準工作液。

　　結果討論

　　呋喃苯烯酸鈉標準樣品一級質譜圖和產物離子掃描質譜圖及呋喃苯烯酸鈉標準溶液MRM色譜圖見圖2、圖3。

　　線性關係

　　按以上分析條件進行測定，以濃度為橫坐標，峰麵積為縱坐標，以1、10、25、50、100µg/L標準工作液濃度點，采用外標法建立校準曲線，如圖4所示，呋喃苯烯酸鈉在線性濃度範圍內線性相關性良好，相關係數為0.9993。(校準曲線參數見圖3)

　　檢出限和定量限

　　配製7份1µg/L標準溶液，進樣分析，對上述測定結果剔除離群值後將各自的7次測定結果計算其標準偏差S，此時檢出限MDL=3.14×S，定量限LOQ=4×MDL。測定結果如表4所示。

　　精密度實驗

　　配製低中高濃度的混合標樣依次平行測定6次，呋喃苯烯酸鈉的保留時間和峰麵積的相對標準偏差分別在0.07%～0.107%和0.98%～1.51%之間，結果表明係統具有良好的精密度。

　　實際樣品分析及回收率實驗

　　將所建立的分析方法用於實際樣品分析，檢測牛奶樣品，未檢測到呋喃苯烯酸鈉。圖5為牛奶樣品的MRM色譜圖。在牛奶樣品中添加濃度為1.0µg/kg的混合標準溶液，加標樣品MRM色譜圖如圖6所示，加標回收率結果見表6。

　　結論

　　本文建立了一種使用島津三重四極杆質譜儀LCMS-8040測定乳製品中呋喃苯烯酸鈉殘留量的分析方法。呋喃苯烯酸鈉在1～100µg/L線性範圍內線性良好，相關係數達到0.9999。對低中高不同濃度的混合標準溶液進行精密度實驗，連續6次進樣保留時間和峰麵積的相對標準偏差在0.07%～0.107%和0.98%～1.51%之間，儀器精密度良好。考察牛奶樣品分析及加標實驗，呋喃苯烯酸鈉的回收率範圍為86.4%，可以滿足乳製品中呋喃苯烯酸鈉殘留量的檢測需求。