□ 徐永威 沃特世科技(上海)有限公司

　　2013年1月，新西蘭牛奶及奶製品被檢測出含有少量的有毒物質雙氰胺，新西蘭政府已經下令禁售含有雙氰胺的奶類產品。由於中國是新西蘭奶製品的出口大國，所以這一敏感的世界杯賽程預測問題又一次觸動了全中國人民的心。沃特世(Waters®)公司基於全新的ACQUITY UPC2技術平台，推出快速而便捷的UPC2-MS檢測方案。二氰二氨(俗稱雙氰胺)，縮寫為DICY或DCD，是氰胺的二聚體，也是胍的氰基衍生物。化學式C2H4N4，白色結晶粉末，可溶於水、醇、乙二醇和二甲基甲酰胺，幾乎不溶於醚和苯。不可燃，幹燥時穩定。

　　雙氰胺極性非常大，傳統C18色譜柱及HILIC色譜柱均難以保留，對於複雜的奶製品基質來說會與雜質共流出，影響分析目標化合物的定量和定性，這是一個分析難點。UPC2技術，采用超臨界CO2和適量的助溶劑為流動相，以正相的分離模式，實現化合物的分離。因此，對於反相LC難以保留的化合物，UPC2能提供很好的保留，並通過簡易的梯度優化，即可實現很好的定量分離。

　　實驗方法

　　樣品前處理方法

　　取1g奶粉加2mL水溶解，然後加乙腈定容至10mL，並沉澱蛋白，12000轉高速離心10min;取上清液，經0.22μm濾膜過濾後直接上樣分析。

　　儀器方法

　　UPC2方法：

　　儀器：ACQUITY UPC2係統;

　　流動相A：CO2;

　　流動相B：甲醇(2%水);

　　色譜柱：ACQUITY UPC2 BEH 3.0x50mm 1.7µm;

　　流速：2.2mL/min;

　　柱溫：50℃;

　　背壓：2200psi;

　　進樣體積：3µL;

　　梯度曲線：見表1。

　　MS參數：

　　毛細管電壓：3.2kv;

　　脫溶劑氣溫度：450℃;

　　脫溶劑氣流速：800L/hr;

　　碰撞氣流速：0.2mL/min(參閱表2)。

　　實驗結果

　　雙氰胺標準曲線(配置1.0、2.0、10.0、50.0、100.0ppb濃度雙氰胺加奶粉基質標準溶液，每個點重複進樣3針，根據檢測結果獲得的標準曲線見圖1)。

　　結論

　　雙氰胺極性非常大，傳統C18色譜柱及HILIC色譜柱均難以保留，采用沃特世公司全新推出的ACQUITY UPC2係統，BEH 3.0x50mm 1.7µm色譜柱，對雙氰胺有很好的保留，並能快速排除基質的幹擾，進行雙氰胺的定量分析。采用上述方法進行雙氰胺的分析，可大大簡化前處理的流程，隻需簡易的蛋白沉澱法，即可滿足定量檢測的要求，對於實際的檢測工作，能使工作事半功倍。