固相萃取——氣相色譜法測定果蔬中 有機氯和擬除蟲菊酯類農藥殘留

　　□ 呂建霞 餘翀天 賽默飛世爾科技(中國)有限公司

　　有機氯農藥曾經被廣泛使用，其化學性質穩定，在環境中難以進行化學和生物降解，殘留期長，有生物蓄積作用，在我國從1980年開始禁用，但其至今仍存在於自然界中，並可通過食物途徑對人類造成危害。作為有機氯農藥的替代品之一，擬除蟲菊酯類農藥在農業生產中得到了廣泛應用，這類農藥施用量較小、易生物降解、殘留期較短，但由於其對病菌、害蟲、雜草等具有更強的殺傷作用，因此對哺乳動物的傷害不容忽視。目前世界許多國家都對有機氯及擬除蟲菊酯農藥的最高殘留限量作了嚴格的規定，其中最嚴苛的應該是日本的肯定列表製度，設定了進口食品、農產品中可能出現的734種農藥、獸藥和飼料添加劑的近5萬個暫定標準，對沒有涉及到的產品，設定了統一標準0.01mg/kg。因此有必要建立一個前處理過程簡單、檢測靈敏度高的方法來測定果蔬中的有機氯農藥和擬除蟲菊酯類農藥。

　　儀器

　　Trace1310氣相色譜儀，配ECD檢測器(Thermo Scientific);AS1310自動進樣器(Thermo Scientific);高速均質儀;離心機;天平;旋轉蒸發儀;

　　耗材

　　色譜柱：TG-5MS (30mx0.25mmx0.25μm)。

　　試劑與標準品

　　標 準 品 (α- 六 六 六，β- 六 六 六，γ- 六 六 六，δ-六六六，六氯苯，氯硝胺，西瑪津，莠去津，五氯硝基苯，百菌清，敵稗，乙烯菌核利，七氯，艾氏劑，腐黴利，o,p'-DDD，o,p'-DDT，p,p'-DDE，p,p'-DDD，p,p'-DDT，硫丹，丁草胺，狄氏劑，乙酯殺蟎醇，異狄氏劑，三氯殺蟎醇，異菌脲，胺菊酯，聯苯菊酯，甲氰菊酯，高效氯氟氰菊酯，氯菊酯，氟氯氰菊酯，氯氰菊酯，氟氰戊菊酯，氰戊菊酯，溴氰菊酯，氟胺氰菊酯) 由百靈威公司提供，乙腈、甲苯等有機試劑為Fisher公司提供。其他未注明試劑均為分析純，由國藥集團試劑有限公司提供。

　　標準溶液的製備

　　儲備液：準確稱取10.0mg農藥標準品，用正己烷稀釋，逐一配製成100mg/L單一農藥標準儲備液，儲存在冰箱中備用。

　　混合標準中間液：將38種農藥逐一吸取1mL的單個農藥儲備液分別注入同一容量瓶中，用正己烷稀釋定容至100mL，得到濃度為1mg/L的混合標準中間液。

　　混合標準工作溶液：取混合標準中間液，用甲苯稀釋配製成20、40、100、200、400μg/L，待GC/ECD分析。

　　樣品前處理

　　稱取經磨碎的試樣20.00g，加入40mL乙腈均質提取1min，加入5.0g氯化鈉，繼續均質1min。然後以10000rpm的速度離心10min，取上清液20mL至旋轉蒸發瓶中蒸至近幹。待固相萃取淨化。於Cleanert PC/NH2-SPE小柱 (500mg，6mL)上層添加1cm高無水Na2SO4;先用8mL乙腈+甲苯(3+1，體積比)淋洗層析柱，小柱淋洗後下麵接上旋轉蒸發瓶接收溶液，再將濃縮後的提取液用6mL乙腈+甲苯(3+1，體積比)分三次洗滌旋蒸瓶，轉移至層析柱內，然後用25mL乙腈+甲苯(3+1，體積比)混合溶劑洗脫，洗脫液旋轉蒸發濃縮近幹後，用甲苯定容至1.0mL待上機分析。

　　實驗條件

　　色譜柱：TG-5MS (30mx0.25mmx0.25μm);

　　柱溫：60℃(1min)，15℃/min到180℃(3min)，5℃/min到230℃(1min)，最後20℃/min至280℃(20min);

　　進樣模式：不分流進樣，不分流時間為1min;

　　進樣量：1μL;

　　進樣口溫度：280℃;

　　載氣：氮氣 (99.999%)，恒流模式，1mL/min;

　　檢測器溫度：300℃;尾吹氣：氮氣，流速：15mL/min。

　　結果與討論

　　取20μg/L標準溶液，按照上述色譜條件測定，得到色譜圖1。

　　配製38種農藥組份的混合標準溶液，各濃度分別為:20.0,40.0,100.0,200.0, 400.0μg/L，采用上述方法分別進樣分析，考察各組分在20.0～400μg/L濃度範圍內的線性。方法回收率和重現性的考察：甘藍和水果黃瓜樣品分別進行加標回收實驗，加標水平為10μg/kg，做3個平行樣品，計算回收率和精密度。以3倍信噪比計算各組分的萬法檢出限。結果表明，38種農藥組分線性關係良好，回收率在71.3%～113.6%之間，精密度(RSD值，n=3)在2.7%～9.9%之間，檢出限在0.1～2.0μg/kg之間，儀器檢測靈敏度高。

　　實際樣品測試

　　采用樣品加標，觀察各色譜峰出峰情況(圖2)。對實際樣品測試，也未出現色譜峰幹擾情況。標準溶液、樣品、樣品加標譜圖見圖2。

　　結論

　　采用賽默飛世爾新型的氣相色譜儀檢測果蔬中的農藥殘留，準確定量目標物，RSD值小，靈敏度高，無雜質峰幹擾。石墨碳/氨基複合固相萃取小柱能夠去除果蔬中的基質幹擾，方法簡單，自動化程度高，淨化效果理想。