超高效液相色譜三重四極杆質譜聯用法測定蔬菜中的三十七種農藥殘留

　　□ 高慧 李長坤 李月琪 島津企業管理(中國)有限公司北京分析中心

　　我國新頒布的GB/T 2763-2014 《食品中農藥最大殘留限量》，將於8月1日起開始施行，食品農藥最大殘留限量指標新增1357項。麵對大量的受管控農藥和很低的允許殘留量，開發高靈敏分析方法顯得更為迫切。本文參考美國AOAC規定的樣品前處理方法，使用島津超高效液相色譜儀LC-30A和三重四極杆質譜LCMS-8050聯用，建立了蔬菜中37種例行監測農藥的超高效液相色譜——三重四極杆串聯質譜聯用的分析方法。

　　實驗

　　儀器

　　本實驗使用島津超高效液相色譜儀LC-30A與三重四極杆質譜儀LCMS-8050聯用係統。具體配置為LC-30AD×2輸液泵，DGU-20A5在線脫氣機，SIL-30AC自動進樣器，CTO-30A柱溫箱，CBM-20A係統控製器，LCMS-8050三重四極杆質譜儀。

　　分析條件

　　液相色譜條件

　　分析儀器：LC-30A係統;

　　色譜柱：Shim-pack XR-ODSIII, 2.0mm I.D.×150mm L,2.2μm;

　　流動相：A：5mM醋酸銨+0.02%甲酸水溶液;B：甲醇;

　　流速：0.4mL/min;

　　進樣體積：1μL;

　　柱溫：40℃;

　　洗脫方式：梯度洗脫，B相初始濃度為10%。

　　質譜條件

　　分析儀器：LCMS-8050;

　　離子源：ESI，正負離子同時掃描;

　　離子源接口電壓：+4.5kV; -3.5kV;

　　霧化氣：氮氣3.0L/min;幹燥氣：氮氣10L/min;加熱氣：氮氣10L/min;碰撞氣：氬氣;脫溶劑管溫度：250℃;加熱模塊溫度：400℃;接口溫度：250℃;掃描模式：多反應監測(MRM);駐留時間：10ms;延遲時間：3ms。

　　樣品製備

　　樣品前處理方法：參照美國AOAC 2007.01QuEChERS樣品前處理方法，使用島津技邇QuEChERS產品進行樣品前處理。取15g均質樣品加入50mL離心管中，加入15mL乙腈/甲酸(99/1，v/v)提取液，渦混後加入6gMgSO4和1.5gNaOAc，迅速進行振蕩，然後離心5min(8000rpm)。取上清液1mL，加入盛有150mgMgSO4，50mgPSA，50mgC18粉末的離心管中，渦混離心，上清液過濾膜後上機。

　　標準溶液配製：用甲醇配製500mg/L，37種混合標準溶液，用基質提取液逐級稀釋成0.5μg/L、1.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L和100.0μg/L的不同濃度的標準樣品。

　　結果與討論

　　線性關係

　　將配製的0.5μg/L、1.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、50.0μg/L和100.0μg/L不同濃度的標準溶液，按上述分析條件進行測定，外標法製作校準曲線，線性良好。

　　精密度實驗

　　對0.5μg/L、1.0μg/L和5.0μg/L混合標準溶液連續6次進樣，考察儀器的精密度，其保留時間和峰麵積的重複性結果如表1所示。3個濃度標準品的保留時間和峰麵積的相對標準偏差分別在0.02%～0.17%和0.46%～4.89%之間，儀器精密度良好。

　　基質提取液加標精密度實驗

　　用空白的普通白菜、甘藍、菜豆三種基質提取液加混標至濃度為5μg/L，連續20針進樣，考察保留時間和峰麵積穩定性，保留時間和峰麵積的相對標準偏差分別在0.02%～0.22%和0.63%～4.93%之間。具體結果如表2。

　　回收率實驗

　　將空白甘藍樣品進行5.0μg/L和50.0μg/L濃度加標後，按照上述樣品製備方法處理後上機，平行3份樣品考察回收率和RSD。具體結果見表3。5.0μg/L加標回收率在80.5%～105.2%之間，50.0μg/L加標回收率在89.6%～104.5%之間。

　　實際樣品分析

　　對市售普通白菜進行分析後，檢出多菌靈、三唑酮、咪鮮胺和噠蟎靈，具體結果及色譜圖見表4、圖1。

　　結論

　　建立了一種使用島津超高效液相色譜儀LC-30A和三重四極杆質譜儀LCMS-8050聯用測定蔬菜樣品中37種農藥的方法，在20min內完成37種農藥的分離。不同濃度的精密度實驗結果表明：保留時間和峰麵積的相對標準偏差分別在0.02%～0.17%和0.59%～4.89%之間，儀器精密度良好;校準曲線相關係數均大於0.995;儀器檢出限在0.002～0.143μg/L之間，定量限在0.0072～0.433之間;不同蔬菜基質中5μg/L濃度加標的保留時間和峰麵積的相對標準偏差分別在0.02%～0.17%和0.46%～4.89%之間;采用QuEChERS前處理方法的加標回收率在80.5%～105.2%之間。該方法分析速度快、重複性好、靈敏高，適合蔬菜中常用農藥的高靈敏度檢測。