市售蜂蜜中花粉粒總數測定

2021-08-30 14:50:49 來源: 世界杯賽程預測 導刊

市售蜂蜜中花粉粒總數測定
徐姍娜,盧 軍,侯鴻飛,唐 蕾,金菊萍
(漢中市食品藥品監督檢驗檢測中心,陝西漢中 723000)
摘 要:花粉是天然蜂蜜具有確定性、穩定性和追溯性的天然標識物,可以根據蜂蜜中花粉的種類和含量來區分蜂蜜的品種、辨別優劣蜂蜜。本試驗隨機抽取了13批漢中市市麵上銷售的蜂蜜,根據《蜂蜜中植物花粉的測定方法》(GB/T 23194—2008),分別測定其全部花粉粒含量,以對其品質優劣進行初步判定。結果表明,市售的不同品牌、不同批次的蜂蜜中花粉粒總量差距較大,不同離心轉速對每個計數室花粉粒總數無顯著性影響。
關鍵詞:蜂蜜;花粉粒;總數測定
蜂蜜是蜜蜂采集植物的花蜜,與自身分泌物結合後,經充分釀造而成的天然甜物質[1]。蜜蜂采集花蜜時會吸入一部分花粉到蜜囊中,花蜜中不可避免地混入了蜜源植物的花粉,而每種花粉都有自己特有的形態特征,所以花粉是天然蜂蜜具有確定性、穩定性和追溯性的天然標識物。根據蜂蜜中花粉的種類和含量可區分蜂蜜的品種、辨別優劣蜂蜜。
陝西省漢中市北依秦嶺,南屏巴山,氣候溫和濕潤、幹濕有度,造就了物種的多樣性。森林覆蓋率為52%,林草的植被率達60%,境內的兩大水係(漢江和嘉陵江)均為長江一級支流,是國家“南水北調”中線工程的水源地。漢中具有良好的蜂養殖自然生態環境資源,土蜂養殖曆史悠久,主要生產的蜜種是油菜花蜜和百花蜜。漢中是傳統的油菜種植生產基地,全市有7.5億m2的油菜花田,為當地蜂群提供了充足蜜源。而秦巴山脈花草資源豐富,大量的野生山花以及野生或人工栽培的中草藥資源,如黨參、山茱萸、大黃、天麻、杜仲、厚樸、五味子等,都是本地產百花蜜的重要蜜源。近年來,漢中市蜂蜜產業得到突飛猛進發展,2020年7月20日實施的優質漢中蜂蜜(T/HZSBX 02—2020)[1]和優質漢中土蜂蜜(T/HZSBX 03—2020)[2]中均將蜂蜜中花粉濃度列為特征指標,參考限量值分別為≥10 000個/mL
和≥14 000個/mL。
本研究隨機抽取了13批漢中市市麵上銷售的蜂蜜,根據《蜂蜜中植物花粉的測定方法》(GB/T 23194—2008)[3],分別測定其全部花粉粒含量,以對其品質優劣進行初步判定。
1 材料與方法
1.1 材料
13批蜂蜜,購於漢中市市場。
1.2 試劑與儀器
1.2.1 試劑
硫酸,天津市風船化學試劑科技有限公司;乙酸,天津市天力化學試劑有限公司;乙酸酐,天津市天力化學試劑有限公司;甘油,天津市科密歐化學試劑有限公司;苯酚,天津市天力化學試劑有限公司。
1.2.2 儀器
冷凍離心機H2100R,湖南湘儀離心機儀器有限公司;數顯恒溫水浴鍋HH-8,國華電器有限公司;光學顯微鏡Ci-L,尼康儀器有限公司。
1.3 試驗方法
1.3.1 試樣的製備
未結晶的樣品,攪拌均勻備用。有結晶的樣品,在密閉情況下,置於55 ℃左右的水浴中溫熱,振蕩,待樣品全部融化後攪勻,冷卻至室溫備用。稱取均勻蜜樣25 g,加入40 ℃的50 mL蒸餾水,使蜂蜜均勻溶解。
1.3.2 花粉粒總數測定
將試樣溶液倒入離心管中,以2 000 r/min的速度離心10 min,棄去55 mL的上清液,加入5 mL乙酸並拌勻,浸泡2 h。進行離心(2 000 r/min,10 min),棄去10 mL上清液,加入新鮮配製的乙酸酐和硫酸的混合液6 mL,並拌勻,然後將離心管放入80~90 ℃水浴中加熱7 min。停止加熱後,迅速離心(2 000 r/min,10 min),棄去5 mL上清液,加
10 mL蒸餾水洗滌,離心水洗3次後,棄去上清液,使試樣溶液留下約5 mL的樣液。加入1 mL 50%的甘油保存,並加入2~3滴苯酚作為防腐劑。
利用血細胞計數板製片,靜置5 min後,於顯微鏡下計數,先用低倍鏡找到計數室所在位置,然後換高倍鏡進行計數。本次采用的血細胞計數板為25中方格、16小方格款。
1.4 不同離心轉速對每個計數室花粉粒總數的影響測定
以6號蜂蜜為樣本,按照1.3.1和1.3.2方法將步驟中所使用的離心轉速和時間依次設定為4 000 r/min 10 min、
6 000 r/min 10min、8 000 r/min 10 min、10 000 r/min 10 min、
10 000 r/min 5 min,分別計數花粉粒總數。
2 結果與分析
2.1 13批蜂蜜花粉粒總數的測定
按照1 mL樣液中的總花粉粒數=25個中方格總花粉粒數×104計算,全部13批蜂蜜花粉粒總數統計結果見表1。由表1可知,不同品牌、不同批次的蜂蜜中花粉粒總量差距較大,其中2、4、7號樣品中花粉粒數量為0,均購自本地超市,屬大規模工業生產產品。導致花粉粒數為0的原因有可能是這些品牌的蜂蜜在經過高密度過濾,移除了花粉在內的各種雜質[4],花粉一方麵會影響到蜂蜜的營養價值,另一方麵大規模生產中的高溫加熱也會直接影響蜂蜜的口感和風味。因此,選擇小規模生產的土蜂蜜,可以最大程度地品嚐到蜂蜜的原始風味。廣大消費者在購買時可以根據自己的需求選購。
2.2 不同離心轉速對每個計數室花粉粒總數的影響
以6號蜂蜜為樣本,測定不同離心轉速對每個計數室花粉粒總數的影響(見表2),由表2可知,增大離心轉速後所得花粉粒總數與國標要求的2 000 r/min比較並無顯著差異(P>0.05),而將轉速提高至10 000 r/min,時間縮短至
5 min時所得花粉粒總數與國標要求的2 000 r/min離心
10 min比較無顯著性差異(P>0.05),因此在實驗室大批量測定蜂蜜中花粉濃度且條件允許時,可以采用提高轉速縮短時間的方式加快試驗進度。
3 討論
本研究以13批漢中市市售蜂蜜為研究對象,采用國標方法進行了測定,因本次試驗所采樣品多數為本地生產的百花蜜,所以並未測定單一種類花粉的含量和濃度,而是測定總花粉粒數量。結果顯示,不同品牌、批次的蜂蜜中花粉含量差異較大。其中兩種高山棒棒蜜所含花粉含量最高,可能與取蜜方式、過濾效率有直接關係,因高山棒棒蜜多采用壓榨取蜜法,會混入更多蜂脾和花粉,也帶來了更高的營養價值。有研究顯示壓榨蜂蜜中的花粉含量可比分離蜂蜜高出4、5倍之多[5]。本次試驗顯示不同蜂蜜的花粉粒測定的確可以反映蜂蜜的品質高低,國標並沒有將蜂蜜中花粉粒含量作為判定蜂蜜真假的依據,但筆者認為蜂蜜中花粉粒含量的測定試驗操作簡單、耗時短、成本低,可以作為一種判斷蜂蜜真偽的初篩手段,經檢測不含花粉粒或者所含花粉粒種類與標示蜜源不吻合者,再通過蛋白質為“內標”的同位素檢測法或高效液相色譜質譜聯用法進行真假的鑒定。
參考文獻
[1]漢中市標準化協會.優質漢中蜂蜜:T/HZSBX 02—2020[EB/OL].(2020-06-20)[2021-05-11].http://down.foodmate.net/standard/sort/12/81156.html.
[2]漢中市標準化協會.優質漢中土蜂蜜:T/HZSBX 03—2020[EB/OL].(2020-06-20)[2021-05-11].http://www.doc88.com/p-08661728203259.html.
[3]中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局,中國國家標準化管理委員會.蜂蜜中植物花粉的測定方法:GB/T 23194—2008[S].北京:中國標準出版社,2008.
[4]魏麗,曾誌將.不同目數的濾布過濾對蜂蜜中植物花粉含量及濃度的影響[J].蜂蜜雜誌,2009,29(4):6-8
[5]張言政,胡福良.分離蜂蜜和壓榨蜂蜜的品質對比[J].中國蜂業,2017,68(2):63

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