氣相色譜-質譜法測定韭菜中5種農藥前處理方法的比較

摘 要：本文對韭菜中5種農藥（腐黴利、氟蟲腈、毒死蜱、氯氰菊酯、氯氟氰菊酯）殘留量進行了固相萃取和QuEChERS兩種前處理方法比較。結果表明，兩種淨化方法的5種農藥在0.01～0.50 µg/mL範圍內與目標物的響應值呈良好的線性關係，相關係數均大於0.9995，方法定量限均為0.01 mg/kg。采用QuEChERS法前處理時，5種農藥的平均回收率為83.0%～116.2%，為0.8%～4.4%；采用SPE法前處理時，5種農藥的平均回收率在80.0%～108.2%，為0.8%～4.6%。兩種前處理方法均滿足農藥殘留分析要求。
關鍵詞：韭菜；氣相色譜-質譜法；固相萃取；QuEChERS
為提高農作物產量，防治病蟲害，高毒性農藥的使用量越來越多。食品中特別是水果、蔬菜的農藥汙染通過食物鏈在人體積累，給人體健康帶來危害，但由於農藥殘留對人體產生的生理變化不明顯，往往被忽視^[1]。目前農藥殘留所采用的檢測方法主要有氣相色譜法、氣相色譜-質譜聯用法、液相色譜法、液相色譜-質譜聯用法。由於韭菜基質較為複雜，天然色素含量較高，有揮發性含硫組分，尤其冷凍後的韭菜較難通過微波加熱消除巰基，因此使用上述方法檢測農藥殘留時，經提取淨化後方可上機^[2]。
檢測農藥殘留常用的淨化方式有固相萃取、硫酸磺化、凝膠淨化、QuEChERS等^[3-4]，本文利用固相萃取和QuEChERS兩種淨化方式對比了韭菜中腐黴利、氟蟲腈、毒死蜱、氯氰菊酯和氯氟氰菊酯這5種農藥的殘留量，並進行了回收率、標準曲線、準確度、精密度等特性參數實驗，為相關工作者提供選擇。
1 材料與方法
1.1 主要儀器
氣相色譜質譜聯用儀，島津GCMS-TQ8040NCI，EI電子轟擊源；電子分析天平（梅特勒ME204）；渦旋混合器（IKA VXR B S025）；水浴恒溫振蕩器；高速離心機（湘儀）；全自動濃縮儀（LabTech MV5）；旋轉蒸發儀（廣東IKA RV-10）。
1.2 試藥
農藥的標準品：腐黴利、氟蟲腈、毒死蜱、氯氰菊酯、氯氟氰菊酯，以上標準溶液濃度均為1 000 µg/mL；環氧七氯B，濃度為100 µg/mL；試劑：氯化鈉（分析純，天津科密歐）；乙腈（色譜純，TEDIA）；乙酸乙酯（色譜純，TEDIA）；甲苯（色譜純，TEDIA）；QuEChERS淨化管：885 mg硫酸鎂、150 mgPSA、15 mgGCB；固相萃取柱：Cleanert S C₁₈500 mg/6 mL，Agela；石墨碳黑-複合氨基複合柱 500 mg/500 mg/6 mL，Agela。
1.3 氣相色譜-串聯質譜分析條件
1.3.1 色譜條件
色譜柱為Rxi-5Mil MS石英毛線管色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25 µm）；載氣：氦氣，純度≥99.999%，流速1.69 mL/min；進樣溫度為220 ℃；進樣方式：不分流進樣，進樣體積1 µL；柱溫：初始溫度60 ℃，保持1 min，40 ℃/min升到120 ℃，保持0 min，5 ℃/min升到310 ℃，保持1 min。
1.3.2 質譜條件
離子源溫度為250 ℃，接口溫度為280 ℃，溶劑延遲13 min，多反應監測（MRM）采集模式，其他質譜條件見表1。 1.4 樣品前處理、提取
在市場上隨機采購10批次韭菜，將其全部切碎混勻，用四分法取樣，搗碎均質成漿，稱取樣品量1 kg放入聚乙烯瓶中，-18 ℃下保存。準確稱取10.0 g樣品，置於100 mL離心管中，加入20 mL乙腈，高速勻漿2 min，超聲振蕩提取30 min，加入4 g氯化鈉，高速勻漿1 min，以5 000 r/min離心5 min。
1.5 淨化方法
1.5.1 QuEChERS淨化法
準確吸取10 mL上清液於裝有900 mg無水硫酸鎂+150 mgPSA+15 mg GCB的15 mL塑料離心管中，渦旋混勻約1 min，5 000 r/min離心5 min。準確吸取淨化後的上清液5 mL到10 mL比色管中，40 ℃水浴中氮吹至近幹。加入20 µL的環氧七氯內標溶液，1 mL乙酸乙酯複溶，過0.22 µm有機微孔濾膜，用於測定。
1.5.2 SPE淨化法
將C₁₈柱放入固定架上，加樣前先用10 mL乙腈預洗柱，下接雞心瓶，準確吸取10 mL上清液，並用15 mL乙腈洗滌柱，將收集的提取液和洗滌液在40 ℃水浴中旋轉濃縮至約1 mL，備用。用5 mL乙腈-甲苯（3+1）預淋洗石墨化碳黑-氨基複合固相萃取柱，棄去流出液。加入濃縮液，雞心瓶用2 mL乙腈-甲苯（3+1）分次淋洗，重複3次，將洗滌液轉移至柱中，再用25 mL乙腈-甲苯（3+1）洗脫，收集流出液，40 ℃水浴中旋轉濃縮至近幹。用正己烷定容至2 mL，加入內標液80 µL，混勻上機。
1.6 樣品的定性與定量分析
取經過前處理的樣品與農藥混合標準工作液1.0 µL，在氣相色譜/質譜條件下進行測定，保留時間及碎片離子可以進行定性、定量分析，用內標法計算樣品中的農藥濃度。檢測時，色譜峰保留時間在±5%內，在質譜圖中所選擇的離子對都出現，離子對豐度比和相近質量濃度標準品的離子豐度比一致，則該樣品中存在這種農藥。為減少基質的影響，定量時用陰性基質樣品配製混合標準工作溶液，標準溶液的濃度與待測化合物的濃度相近，要求曲線相關係數大於0.995。
2 結果與分析
2.1 方法的線性方程
分別按照QuEChERS淨化與SPE淨化方法製備兩種不同的陰性韭菜基質溶液，配製成質量濃度為0.01～0.50 µg/mL的標準工作液，基質標準溶液內標法定量。按照1.3的條件測定，結果見表2，兩種淨化方法的5種農藥在0.01～0.50 µg/mL範圍內與目標物的響應值呈良好的線性關係，相關係數均大於0.999，方法定量限均為0.01 mg/kg。
2.2 加標回收率和精密度
按照QuEChERS淨化與SPE淨化對陰性韭菜樣品進行加標回收試驗，選取高、中、低3個不同含量，6次平行測定，計算回收率、平均回收率、相對標準偏差。由表3知，采用QuEChERS法前處理時，5種農藥的平均回收率為83.0%～116.2%，為0.8%～4.4%；采用SPE法前處理時，5種農藥的平均回收率在80.0%～108.2%，為0.8%～4.6%。QuEChERS和SPE回收率比較結果表明，兩種淨化方式法測定同一種農藥同一個含量回收率存在差異，但均滿足農藥殘留分析要求。 3 結語
通過對兩種前處理方法的比較，發現兩種方法存在差異，但兩種前處理方法的定量限、回收率、精密度都滿足農藥殘留分析要求，可應用於實際樣品檢測。
參考文獻
[1]吳玉傑.食品中農藥殘留分析方法分析[D].長沙:湖南師範大學,2004.
[2]周勇,樸秀英,廖先駿,等.韭菜中腐黴利的殘留檢測及長期膳食暴露評估[J].農藥農學報,2021,23(2):373-379.
[3]國家衛生和計劃生育委員會,農業部,國家食品藥品監督管理總局.世界杯賽程預測國家標準 水果和蔬菜中500種農藥及相關化學品殘留量的測定氣相色譜-質譜法GB 23200.8—2016[S]．北京:中國標準出版社,2016．
[4]國家衛生健康委員會,農業農村部,國家市場監督管理總局.世界杯賽程預測國家標準 植物源性食品中208種農藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質譜聯用法:GB 23200.113—2018[S]．北京:中國標準出版社,2018．