2021-05-26 17:31:50 來源: 世界杯賽程預測 導刊
API 20E鑒定係統等兩種檢測方法應用於食品中沙門氏菌的檢測結果比較
□ 韓誌雙 胡鳳 自貢檢驗檢測院
摘 要:本實驗采用API 20E鑒定係統和國標生化鑒定方法,分別對2020年四川省市場監督管理局能力驗證計劃提供的樣品中分離得到的沙門氏菌可疑菌落進行鑒定。結果表明,兩種方法的檢測結果均為沙門氏菌陽性,故可用於對食品中腸杆菌科致病菌的鑒定,且API 20E鑒定係統更優於傳統生化鑒定方法。
關鍵詞:API 20E 沙門氏菌 鑒定
沙門氏菌是一種食源性致病菌,且大多數食品在生產過程中易接觸到此類汙染物,這也是食品被沙門氏菌汙染的重要途徑。其中,畜禽肉類、蛋類、乳製品等食品最易受到該菌的汙染,尤其是生鮮[1]類食品。由於沙門氏菌對人類的健康威脅較大,故世界各國普遍規定食品中不得檢出該菌。
我國國標方法GB 4789.4-2016[2]中規定了食品中沙門氏菌的檢驗方法,如傳統的生化鑒定方法,但該方法所需時間較長且工作量較大。目前,由於微生物自動化檢測係統與常規鑒定方法相比具有準確、快速地發現和鑒定病原體的特點,因此被越來越多地應用於臨床檢驗、疾病控製等領域[3]。API 20E是梅裏埃公司根據酶促反應及代謝產物檢測而研製的腸杆菌生化鑒定試劑條,API 20E細菌鑒定係統則為國際公認的標準鑒定係統,也是腸杆菌科和弧菌的標準鑒定係統。
本研究將API 20E鑒定係統運用於食品中沙門氏菌的檢驗,並同國標中的生化鑒定方法結果相比較。
1 材料與方法
1.1 儀器設備及試劑
1.1.1 國標生化鑒定方法
生化試劑盒、陽性對照乙型副傷寒沙門氏菌,由廣東環凱微生物科技有限公司製造提供。
1.1.2 API 20E法
API 20E試劑盒、API LAB軟件,法國生物梅裏埃公司製造提供。
1.1.3 供試品來源
奶粉樣品由四川省食品藥品檢驗檢測院提供。
1.2 試驗方法
1.2.1 國標生化鑒定方法
樣品按GB 4789.4-2016經過選擇性瓊脂平板增菌,經TSI、賴氨酸脫羧酶初步生化確定為疑似沙門氏菌後,將菌落純化,配製成菌懸液,具體按廠家提供的試劑盒使用說明書執行。
1.2.2 API 20E法
樣品按GB 4789.4-2016經過選擇性瓊脂平板增菌,經TSI、賴氨酸脫羧酶初步生化確定為疑似沙門氏菌後,將菌落純化,配製成菌懸液,接種於試劑條,於36℃培養18~24h,觀察生化反應結果。然後,根據API LAB軟件得到鑒定結果。
2 結果和討論
2.1 結果
生化鑒定結果見表1,API 20E鑒定結果見表2。
2.2討論
綜上所述,API 20E鑒定係統和國標生化鑒定方法均適用於沙門氏菌的鑒定。API 20E是腸杆菌科與其它G一杆菌和弧菌的標準鑒定係統,即可以用一種鑒定試劑條來鑒定大腸杆菌、沙門氏菌、誌賀氏菌及副溶血性弧菌等不同的致病菌。針對國標方法,本實驗采用的生化試劑盒隻能鑒別一種致病菌,從微生物檢測實驗室耗材配備角度來看,API 20E可以降低試驗成本,優化檢測程序。
API 20E生化反應達21種,能有效保證該方法鑒定結果的準確性,不僅集約化了生化試驗,也使後續的血清學反應操作更為簡便。並且,API 20E僅需試劑條及API LAB軟件,不需要配置其他生化試劑,能滿足基層實驗室的相關需求。
參考文獻:
[1] 韓晗,韋曉婷,等.沙門氏菌對食品的汙染及其導致的食源性疾病[J].江蘇農業科學.2016,44(5):15-20.
[2] 《中華人民共和國國家標準食品衛生微生物學檢驗-沙門氏菌檢驗》(GB/T 4789.4-2016).
[3] 莊華君,金映川,楊旭.API20E、VITEK-32在臨床細菌鑒定中的應用[J].中國衛生工程學.2011.8(14):320-322.