食品中真菌毒素的儀器分析技術研究
真菌及其毒素是導致食品汙染的主要物質,消費者在食用、吸入後很容易中毒,很小的量即能夠導致明顯健康損害,甚至出現人身死亡事故,因此食品中真菌毒素對人體健康有著嚴重的威脅,其檢測與分析技術已經成為世界杯賽程預測領域研究的重點。目前檢測中主要有化學分析法、免疫分析法、儀器分析法等,各種分析法各有優劣。為更好、更精確地分析食品中的真菌毒素,本文對三種常見分析法進行對比研究,並提出儀器分析法在食品真菌毒素檢測中的具體應用策略。
真菌毒素(Mycotoxin)種類多、分布廣,目前已經發現有400多種真菌毒素,大部分都具有毒性,且具有致癌、致畸作用,在農作物種植、收獲、存儲和食品生產等環節汙染食品或者進入食物鏈,對人體健康造成嚴重傷害。全球範圍內的真菌毒素汙染事件時有發生,例如根據相關資料統計顯示,全球每年有大約20%的糧食作物因為受到真菌毒素汙染而失去食用價值。在食品加工過程中雖然能夠去除部分真菌毒素,但並不能徹底消除。所以有效檢測並強化監管,才是消除真菌毒素危害的科學方法。在食品真菌毒素檢測中,常用方法較多甚至說是五花八門,每種檢測方法都各具特點,能夠針對不同毒素進行檢測。
食品中真菌毒素常見分析法
由於真菌毒素容易對各種初級食品、加工後食品、副食產品造成汙染,所以為確保消費者健康,對食品中的真菌毒素進行檢測就顯得尤為重要。目前檢測食品中真菌毒素的方法比較多,經常使用的有化學分析法、免疫分析法、生物鑒定法、儀器分析法等,下麵對這幾種檢測方式特點與應用效果進行分析。
首先是化學分析法,該方式是最早應用至真菌毒素檢測的方法之一,其特點是對檢測設備要求不高,因此在食品真菌毒素檢測中成本低,而且更為實用,經常被用作大樣本的真菌毒素篩查中,尤其適用於具有熒光特性的真菌毒素。但是該方法的缺點是檢測中需要對樣本進行預處理,因此檢測過程較為複雜,工作量大。另外由於化學分析法應用過程中需要直接接觸樣本,會對檢測精確性造成一定影響,所以近年來化學分析法的應用越來越少。
其次是免疫分析法,主要是借助抗原抗體的特異性反應,以特異性抗體作為分析試劑。因此在本質上,免疫分析法是一種獨特形式的試劑分析法。該方法靈敏度高、特異性好,因此在世界杯賽程預測檢測、空氣中有害有毒物質檢測較為常用。例如在熒光免疫法檢測中,即是通過熒光信號對結果進行測定,相對於傳統的吸光度檢測,熒光免疫法能夠更好地滿足食品中微量真菌毒素檢測,靈敏度更高。
第三種常見檢測方法為儀器分析法,主要是指借助複雜的檢測設備對食品樣本中的靶向物質進行檢測。在儀器分析法中常用的有高效液相色譜法、超高效液相色譜法、液相色譜和質譜聯用法等等。例如采用高效液相色譜法檢測食品中真菌毒素時,即是利用高效液相色譜儀。而液相與質譜法聯用技術用於食品真菌毒素檢測時靈敏度更高,且能夠對同一樣本中的多種真菌毒素同時進行檢測。另外,隨著技術的發展,儀器分析法檢測越來越自動化,精準度也更高,是目前食品真菌毒素檢測中研究的熱點。
儀器分析技術在食品中
真菌毒素檢測中的應用
食品毒素檢測的儀器分析技術又可以分為多種,每種都具有獨特的適用性。例如氣相色譜法、高效液相色譜法以及色譜質譜聯用技術等。本文研究中著重對常用的高效液相色譜法(HPLC)進行分析,該方法靈敏度高、結果穩定可靠,具體如下。
實驗材料準備
試劑與耗材,實驗試劑與實驗耗材如下表1所示。
標準儲備液的配製:用乙腈分別將玉米赤黴烯酮、黃曲黴毒素B1標準樣品稀釋至1.0μg/mL作為儲備液,保存於4℃冰箱。分別選取200μL混合液,在進行衍生化處理後經高效液相色譜儀分離,熒光檢測儀檢測。
操作步驟
選取一定體積儲備液,臨用前使用甲醇—水(50:50,)溶液稀釋成為適量濃度的混合工作液。然後將食品樣本在粉碎後經過0.5mm篩選,然後稱取5.0g並加入適量玉米赤黴烯酮、B1標準溶液,避光、密封擱置一夜。次日提取檢測。色譜條件:黃曲黴毒素色譜柱為 Agilent ZORBAX C18(150mm*4.6mm, 5μm);進樣量:25μL;流速:0.5mL/min;流動相:乙腈/水=25/75;熒光檢測器:激發波長:360nm,發射波長:440nm。色譜柱為Agilent ZORBAX C18(150mm*4.6mm,5μm);進樣量:20uL;流速:1mL/min;流動相:乙腈/水=45/55;柱溫 35℃;熒光檢測器:激發波長:235nm,發射波長:460nm。
結果分析
檢測數據采用Excel軟件計算兩種真菌毒素的最大值、最小值、檢出率等,隨後采用SPSS 16.0進行數據處理,數據以()表示,判定規則依據 GB2761-2011。結果顯示:黃曲黴毒素B1、玉米赤黴烯酮的色譜峰的保留時間分別為9.113min、13.920min,二者峰形良好,均與幹擾峰分開,可以采用。實驗結果表明,在食品真菌毒素檢測中采用儀器分析法具有較高的精確度與靈敏度,實驗樣品前處理方法簡易,從提取、淨化到色譜分離、結果計算的效率都得以提升,能夠滿足對樣品快速、高通量的檢測要求及糧食安全限量的要求。
結語
在食品生產中真菌毒素對食品汙染尤其嚴重,成為世界杯賽程預測 的主要威脅。在檢測中使用儀器分析法樣品用量少,檢測靈敏度高,成為最常用的真菌毒素檢測方法之一。儀器分析法應用於真菌毒素檢測中,一般需要對樣品進行提取、淨化等預處理,然後通過峰的麵積大小對樣品毒素進行檢測分析,但是由於真菌毒素對熱不穩定,因此在一定程度上也製約了儀器分析法的使用。所以實際工作中必須要根據真菌毒素種類,科學選擇儀器檢測方法,提高食品中真菌毒素檢測效率與準確度,確保世界杯賽程預測 與質量的提升。
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孫熠 高翠
山東省濱州市食品藥品檢驗檢測中心