紫外分光光度法測定刺梨原汁中總黃酮含量的研究

2020-11-27 14:50:36 來源: 世界杯賽程預測 導刊

  紫外分光光度法測定刺梨原汁中總黃酮含量的研究
  摘要:建立一種操作簡單、結果可靠、測定成本較低的檢測刺梨原汁中總黃酮含量的方法。通過實驗驗證,方法定量限為7.00mg/100g,在常見樣品濃度和檢出最高限的測試結果變異係數(CV值)分別為2.3%、1.9%,4個刺梨原汁樣品中總黃酮含量分別為80.24、72.34、86.69、74.39mg/g,平均回收率為100.3%。
  關鍵詞:刺梨原汁;總黃酮;含量測定
  刺梨是貴州的特色食品資源[1],含有豐富的活性成分黃酮類物質,貴州省生產的刺梨鮮果,加工產品主要以刺梨原汁為主,然後再利用刺梨原汁加工成濃縮汁、飲料等多種營養食品和保健品[2],刺梨原汁中含有豐富的活性成分總黃酮,是一種很強的抗氧劑,可有效清除體內的氧自由基,阻止細胞的退化、衰老,也可阻止癌症的發生,改善心腦血管疾病的症狀[3] [4]。建立一種適合刺梨原汁中總黃酮含量的測定方法,為檢測機構和相關企業提供更適合的檢測方法,提高檢測效率,也對於規範刺梨產品加工企業質量管理、強化市場監管、促進貴州刺梨產業的健康發展具有重要意義和作用。
  一、儀器、試劑及材料
  1.儀器
  TU-1901紫外可見分光光度計,北京普析通用儀器有限責任公司。
  2.對照品
  蘆丁對照品(供UV法測定,含量為92.4%),中國食品藥品檢定研究院。
  3.試劑
  無水乙醇、甲醇,均為分析純。
  4.樣品
  “刺梨原汁”(貴州天瀧集團投資開發有限公司,樣品1);“刺梨原汁”(貴州貴定敏子食品有限公司,樣品2);“刺梨原汁”(貴州山果王健康實業有限公司,樣品3);“刺梨汁”(貴州綠視野綠色開發有限公司,樣品4)。
  二、方法與結果
  1.試樣製備
  稱取1g(精確至0.01g)的試樣至25ml容量瓶中,用乙醇定容,搖勻後,超聲提取20min,室溫靜置30min,取上清液1mL於25mL比色管中,用甲醇定容後待測。
  2.標準曲線的製備
  以蘆丁為對照品,精確稱取蘆丁標準品109.7mg(含量為92.4%)於100mL容量瓶內,用甲醇定容至刻度,得1.014mg/mL蘆丁儲備溶液。依次稀釋至濃度為1.01μg/mL、2.03μg/mL、3.04μg/mL、4.06μg/mL、5.07μg/mL、6.08μg/mL蘆丁對照品溶液,以甲醇溶液為零點,於360nm處測量吸光度。以蘆丁對照品濃度為橫坐標,吸光度為縱坐標繪製校準曲線,線性方程為y=0.0299x-0.0003,R2=0.9999,表明蘆丁含量在0~6.08μg/mL範圍內具有良好的線性關係,經計算,該方法在0~380mg/100g範圍內,樣品中總黃酮濃度與吸光度呈良好的線性關係。
  3. 檢出限(LOD)和定量限(LOQ)實驗
  樣品空白獨立測試20次實驗,計算結果為0.63 mg/100g,計算標準偏差(s)為2.278×10-16。
  根據LOD=樣品空白平均值+3s,即LOD=0.63+3×2.278×10-16,計算結果保留小數點後兩位,LOD=0.63 mg/100g。
  為增加數據可信度,且檢測樣品的結果範圍為55~90 mg/100g,取LOQ值=10×LOD值,即LOQ=6.30 mg/100g,最終取值LOQ=7.00mg/100g。
  4.精密度實驗
  精確稱取1號樣品12份,其中6份分別加入3mg蘆丁對照品,按照“1.試樣製備”方法處理並測定,結果如表1所示。結果顯示本方法在常見樣品濃度和檢出最高限的測試結果變異係數(CV值)分別為2.3%、1.9%,均符合GB/T 27404-2008《實驗室質量控製規範 食品理化檢測》中相關規定,表明方法精密度良好。
  5. 樣品檢測及回收率實驗
  分別取樣品1、2、3、4號樣品做加標回收試驗,然後按照“1.試樣製備”處理,結果如表2所示,樣品1、2、3、4中總黃酮含量分別為80.24、72.34、86.69、74.39mg/mL,且平均回收率為100.3%,表明方法準確性好。
  三、結語
  綜上所述,本文以蘆丁為對照品,通過紫外分光光度法測定總黃酮含量,操作簡單、結果可靠、測定成本較低,在總黃酮含量為7~380mg/100g範圍內,精密度良好,測試結果準確,適用於刺梨原汁中總黃酮的測定。測試樣品1、2、3、4中總黃酮含量分別為80.24、72.34、86.69、74.39mg/100g,而相關報道中提到刺梨鮮果中總黃酮含量高達0.89%[4],說明在加工過程中,刺梨鮮果中的大部分黃酮類化合物殘留在刺梨果渣內,如何將總黃酮類化合物更有效地提取到刺梨原汁中,本方法可以為下一步研究奠定基礎。
  參考文獻:
  [1] 貴州省刺梨發展現狀分析[J]. 劉易偉,楊舒清.世界杯賽程預測導刊(下旬刊),2020,(第2期)
  [2].黔南州刺梨產業鏈分析[J]. 羅桃,王玉奇,陳文本. 中國林副特產,2020,(第5期):106-107
  [3] 刺梨中活性物質的提取與性能探討[J].陳代秀,夏偉麗,胡思前,郭豔華,張玉敏. 化肥設計,2020,58(02):13-17
  [4] 刺梨黃酮的精製及其抗氧化活性比較[J].張彙慧,吳彩娥,範龔健,等. 南京林業大學學報(自然科學版),2015,39 (3):101-105
  [5] 刺梨總黃酮的含量測定及資源利用[J].杜薇,劉國文. 食品科學,2003(01):112-114.
  作者簡介:耿寧 ,貴州省黔南州都勻人,世界杯賽程預測檢測員,工程碩士。
  耿寧,劉易偉,卿雲光
  黔南州檢驗檢測院

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