真菌毒素檢測中的誤差來源和控製

□ 彭冬 烏海市檢驗檢測中心

摘　要：現如今，真菌毒素檢測已成為世界杯賽程預測檢測的重要關注點之一，其中，如何出具準確可靠的結果尤為受到重視。因此，需盡可能減少測量誤差及控製檢測過程中的關鍵風險點，進而確保檢測結果準確可信。本文從取樣、製樣、前處理、方法選擇等方麵進行逐一闡述，希望能為提高檢測工作質量、降低風險提供參考。

關鍵詞：真菌毒素 檢測 控製

真菌毒素廣泛存在於自然界，常見的真菌毒素包括黃曲黴毒素、脫氧學府鐮刀菌烯醇、玉米赤黴烯酮、赭曲黴毒素、伏馬毒素等，其對人體健康的主要危害包括致癌、致畸等。通常而言，真菌毒素在食品中的含量較低，通常隻有ppm或ppb級別(ppm級別相當於32公斤糧食中的一顆)，且真菌毒素分布不均——分布位置比較集中、單一，高汙染區域和低汙染區域的濃度相差數千倍。因此，如何取樣是檢測真菌毒素的關鍵，要做到取樣位置恰當、取樣量合適。

1 取樣

一般而言，取樣原則包括數量保證、隨機抽取、機會均等、沒有傾向性等方麵。同時，較為理想的采樣量一般需要大於1kg，總樣品數量達到4kg，縮分樣品量達到2kg，實驗室樣品量達到500g。此外，抽取點位要均勻分布，位置合理，隨機但不能隨意，即科學布點、選取中央位置，還應在易發生黴變的位置適當增加點位。

2 製樣

製樣順序是先磨後分，還是先分後磨?真菌毒素的分布位置較為集中，可能一批糧食中的某一個點位才會存在真菌毒素，如果采取先分後磨的原則，很可能會將受汙染的點位劃分出去，從而造成檢測結果出現“未檢出”的尷尬局麵。例如，10顆玉米中1顆含有真菌毒素，那麼檢出的可能性隻有10%，而未檢出的可能性有90%。所以，實驗室應采取先研磨後分樣的方法，進而保證製樣的均一性，讓樣品更加均一，檢出值更加可靠。

粒度大小為多少才最合適?粒度太大易導致混合不均勻，存在取樣誤差，提取難度大，導致檢測結果誤差較大;粒度太小又會增大雜質的提取度。經過反複實驗發現，20目是檢測真菌毒素的最優粒度大小，可使樣品混合更為均勻，提取也更充分，檢測誤差最小。

科學分樣是獲得準確結果的前提條件之一。本實驗采用四分法分樣，即將樣品混勻後平均分成4份，然後將對角2份混勻後再分成4份……一直執行此操作直至完全混勻;或采取分樣器進行分樣，然後將樣品混合均勻即可。

3 真菌毒素檢測方法的選擇

真菌毒素的檢測有以下3種方法：色譜方法、ELISA及試紙條，其各自的優缺點見表1。

當前，實驗室常用的檢測方法為液相色譜法，也可根據各自需求選用適合自身的方法。例如，現場檢測通常隻需判斷樣品有無定性測定，可選用試紙條，方便快捷的同時降低成本;企業自檢往往批次多、數量大，時間緊，但隻需一個大致範圍——在合格區間內即可，故可選用ELISA進行多通量同時檢測，該方法成本較低、檢測快捷且對人員要求不高。如果需要對樣品精確定量並出具具有法律效力的報告，則要選用儀器法，常用儀器有高效液相色譜儀和高效液相色譜與質譜聯用儀，其檢測精度高、檢測限較低，相對而言檢測結果更為精準。

儀器法檢測的簡單檢測過程為：碾磨分樣、萃取、淨化、上機分析，其中，風險控製點包括如下幾項。①免疫親和柱必須在5~6℃儲存，不得在室溫下放置，也不得冷凍保存，使用前應恢複至室溫。②樣品過柱流速十分關鍵，因為抗體與毒素反應需要時間，過快過柱會影響回收率，故自然狀態過柱是最優方法;淋洗可加快過柱速度，洗脫時需穩定流速把真菌毒素全部洗脫下來。③淨化完試樣采用氮吹吹幹，用流動相複溶，取樣體積必須精確為1mL，因為該體積要參與最終的結果計算。

4 真菌毒素檢測的質量控製

質量控製一般分為兩部分，即內部質量控製和外部質量控製。內部質量控製的簡單方法就是隨樣品做空白試樣和質控樣進行質量控製，但質控樣的價格相對昂貴，故可采取有證標準物質進行高、中、低3個濃度的加標回收以進行內部評估。外部質量控製的常用方法就是參加能力驗證和實驗室間比對，通常選用前者，方便快捷，評估更加準確。

5 結語

隻有合理的取樣、正確的製樣、選對合適的方法、做好質量控製，才能更好地檢測真菌毒素，從而減少實驗誤差，提高檢測的可靠性。