膠體金免疫層析快速定量檢測糧食中鎘殘留
近年來,免疫檢測法因其靈敏度高、檢測時間短而受到業內人士的青睞。其中,膠體金免疫層析法是應用越來越廣泛的一種。在糧食食品檢測中,重金屬鎘是農藥殘留檢測常見的一類物質。如何采取科學高效的檢測方法是糧食食品檢測部門及檢測人員關注和研究的重要內容。隨著化學技術和設備的日益更新,免疫學檢測法被應用於糧食農藥殘留檢測工作中,有效解決了傳統檢測方法的弊端。在免疫學檢測法的應用中,膠體金免疫層析法十分適用。本文進行了該方法的實驗分析和論證,給業內人士一些思路和啟發。
實驗材料與方法
實驗儀器:幹式加熱器、計時器、原子吸收光譜儀、便攜式試紙條讀數儀、離心機、渦旋混合器、篩網(20目)、分析天平
實驗試劑:氯化鈉、乙酸乙酯、硫酸、硝酸、EDTA、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、純水
實驗方法:對樣品進行預處理。取待測糧食樣品質量2.0g,然後將樣品過篩(20目),轉移至幹淨的離心管中並向其中加入0.5moL/L的硝酸溶液6.0mL,加入4.0mL乙酸乙酯,振蕩混勻,4000r/min離心5min。取上清液向其中加入1.0moL/L的硫酸2.0mL,4000r/min離心3min。離心後取下層液體500μL,向其中加入0.5moL/L的PBS緩衝液2.0mL,振蕩混勻後取出250μL,向其中加入0.5moL/L的EDTA溶液200μL,振蕩混勻,備用。
糧食樣品的鎘陰性樣本由石墨爐原子吸收光譜法獲得,本實驗中加標點設定為50.0μg/kg、200μg/kg、400μg/kg。平行實驗3組。根據便攜式試紙條讀數儀的使用說明,建立檢測標準曲線。
方法檢出限測定。對糧食樣品進行檢測,平行實驗3組,以空白組加上3倍的標準差作為檢測樣品的最低檢出限。
回收率測定。對糧食樣品進行檢測,平行實驗3組,將檢測濃度和理論濃度對比,計算回收率。
重複性測定。分別取3個批次的試紙條對糧食樣品進行檢測,平行實驗3組,計算糧食樣品的重複性和變異係數。
實驗結果
根據糧食樣品中空白組的檢測平均值加上3倍標準偏差計算,得到樣品中的重金屬鎘的最低檢出限為10.35μg/kg。樣品回收率為86.1%~103.9%。選取3個不同批次的試紙條進行檢測,檢測重複率在3.3%~8.9%之間。
由檢測得到的數據可知,膠體金免疫層析試紙條檢測對糧食樣品中的重金屬鎘具有較強的識別能力,檢測特異性良好,檢測準確率較高,檢測回收率和重複率符合行業標準。本實驗方法可供業內人士參考和借鑒。
牟沿華
吉林省白城市糧油質量監測站