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檢測乳製品中蔗糖含量的同時檢測乳糖的必要性

2020-06-24 15:53:05 來源: 世界杯賽程預測 導刊

　　檢測乳製品中蔗糖含量的同時檢測乳糖的必要性
　　牛奶是人們日常生活中喜愛的食物之一，營養豐富，容易消化吸收，是理想的天然食品。眾所周知，純牛奶因為原料隻有牛奶，所以是不含蔗糖的，但在實際的檢測過程中，按GB5009.8-2016采用高效液相色譜法檢測牛奶中的蔗糖含量時，在色譜圖上，有時我們會看到疑似蔗糖的色譜峰，該色譜峰的出峰時間與蔗糖標液的出峰時間完全吻合，那麼這到底是不是蔗糖？該如何確定與判斷，我們做了大量的實驗對比，確定了疑似蔗糖的色譜峰並不是蔗糖，而是乳糖。乳糖是牛奶本身就含有的物質，乳糖的存在往往會幹擾蔗糖的檢測，容易讓檢測者誤將乳糖判為蔗糖，影響最終的檢測結果，因此我們對蔗糖檢測的研究對實際的檢測檢驗工作有著重要意義。
　　實驗部分
　　儀器：本實驗使用島津高效液相色譜儀LC-20A 與示差折光檢測器RID-10A。具體配置為：LC-20A×2 輸液泵，SIL-20A自動進樣器，CTO-20A 柱溫箱，CBM-20A 係統控製器， SHIMADZU LCsolution 色譜工作站。
　　試劑與材料：蔗糖、乳糖（國家標準物質，純度均為99%）；乙腈（色譜純）；亞鐵氰化鉀、乙酸鋅（分析純）；實驗用水為一級水。實驗樣品：樣品來源於當地超市購買的牛奶，包括樣品1：三元天愛純牛奶；樣品2：蒙牛純牛奶；樣品3：百菲酪高鈣水牛奶。
　　色譜條件：色譜柱：氨基色譜柱（250L×4.6，5μm）；流動相：乙腈+水；流速：1.0mL/min；進樣體積：10μL；柱溫：40℃
　　主要溶液配製：蔗糖標液（10mg/mL)：稱取經96℃±2℃幹燥過的蔗糖標物0.5g，加水溶解並定容至50mL。乳糖標液（10mg/mL)：稱取經96℃±2℃幹燥過的乳糖標物0.5g，加水溶解並定容至50mL。亞鐵氰化鉀溶液：稱10.6g亞鐵氰化鉀，加水溶解並定容至100mL。乙酸鋅溶液：稱21.9g乙酸鋅，加冰乙酸3mL，加水溶解並定容至100mL。
　　樣品製備：稱取10.0g樣品，加50mL水溶解，分別加5mL亞鐵氰化鉀和乙酸鋅溶液，用水定容至100mL。超聲30min，用濾紙過濾，濾液過0.45μm濾膜過濾至進樣瓶，供液相色譜分析。
　　實驗條件與結果討論
　　實驗一。蔗糖標準溶液：10mg/mL，流動相：乙腈：水=70:30，以此條件進樣，對三元天愛和蒙牛兩種純牛奶進行檢測，並做了加標實驗，發現兩種純牛奶和加標實驗都在蔗糖標液的出峰位置看到了相應的色譜峰，如圖1所示：
　　由圖1可以看出，樣品1、樣品2和樣品1加標的出峰時間與蔗糖標準的出峰時間完全吻合，那究竟是不是蔗糖呢？從理論上來說，純牛奶中是不含有蔗糖的，且由檢測到的蔗糖濃度可以看出，濃度與牛奶中乳糖的含量極為相似，為了確保實驗的準確性，於是又進行了實驗二的驗證。
　　實驗二。配製一個乳糖標液（10mg/mL），采用“實驗一”同樣的條件進樣，發現乳糖標準的出峰時間與蔗糖的出峰時間完全重合了（見圖2），因此懷疑“實驗一”中樣品檢測到的色譜峰極有可能是乳糖。為了驗證這個猜測，我們對流動相進行了調整，將乙腈與水的配比調整為85：15，目的是把乳糖和蔗糖的色譜峰分開。經過再次對標液和“實驗一”的樣品進行重新檢測，發現在蔗糖標準出峰的時間不再看到有色譜峰了，而在乳糖標準的出峰時間則看到了相應的色譜峰，如圖3所示。
　　結論
　　由圖3可見，實驗一中檢測到的色譜峰就是乳糖，而不是蔗糖。通過實驗一和實驗二可以看出，在檢測牛奶中蔗糖含量時，同時對乳糖進行檢測是非常有必要的，否則可能就會發生實驗一的情況，容易造成假陽性的誤判，影響最終的實驗結果。
　　盧錦永
　　柳州市質量檢驗檢測研究中心
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